三萜的检测方法

1 、实验原理：
食品中三萜类物质经氯仿萃取后在香草醛 - 浓硫酸的作用下，生成橙色物质，其颜色深浅与三萜含量成正比。

2 、试剂与材料
香草醛、氯仿、甲醇、浓硫酸均为分析纯试剂；
硫酸溶液：在 100ml 量筒中取水 28ml ，加浓硫酸至 100ml ，按硫酸稀释方法，小心进行。
香草醛溶液：香草醛 8g 加甲醇溶解定溶至 100ml 。

3 、标准物质
齐墩果酸 SIGMA 纯度≥ 97 ％

4 、仪器
水浴锅、分光光度计

5 、绘制标准曲线：
标准溶液：精密量取齐墩果酸标准品 10mg ，以氯仿定溶至 100ml 。
标准曲线：吸取标准溶液 0.0 ， 0.10 ， 0.20 ， 0.50, 1.00 ， 1.50ml 加热挥去溶剂，加入香草醛 0.5ml ，硫酸溶液 5ml 混匀后，于 60 度水浴中保温 30 分钟。
取出后冰水放置 15 分钟 , 于 1cm 比色皿中，以标准液 0.0 管为参比调节零点 , 于波长 550 ± 2nm 处测定吸光值，求直线回归方程。

6 、样品处理
固体样品：精密吸取样品 0.2000 -0.5000g ，加氯仿约 25.0ml ，超声 1 小时，
冷却后，用氯仿定溶 25.0m 1 ，过滤：滤液备用。
液体样品直接用氯仿萃取，取氯仿层备用。

7 、 测定
精密移取样品制备液 0.1-1.0m1 于玻璃试管中，加热挥发掉溶剂加入香草醛 0.5ml ，硫酸溶液 5.0ml 混匀后，于 60 度水浴中保温 30 分钟。于 lcm 色皿中，以试剂空白液为参比调节零点，于波长 550 ± 2nm 处测定吸光值，按下列公式计算 .

8 、计算公式
               cv 1
W （ % ） = ————
               mv 2